Evaluación serológica de dos vacunas
contra la brucelosis bovina
Con el objeto de evaluar la respuesta serológica como forma
indirecta de estimar protección vacunal contra Brucelosis
en terneras, se realizó una prueba a campo en un establecimiento
previamente saneado y con varias recertificaciones de libre
contra la enfermedad.
El estudio se realizó en el marco del convenio que mantiene
la FUCOFA con la Facultad de Veterinaria de la Universidad
Nacional del Litoral (UNL), con sede en Esperanza. El director
del proyecto fue el Dr. Roque Gastaldi.
Se evaluó la respuesta de anticuerpos a dos vacunas comerciales,
en un ensayo de 45 días de duración en los que se realizaron
muestreos periódicos.
Para esto se conformaron tres lotes de terneras (A, B y
C) entre tres y ocho meses de edad, tratando que los mismos
tengan una composición similar en edad, tamaño, estado y
tipo de los animales. Dos grupos fueron vacunados, uno con
cada vacuna, y el restante se lo dejó como control sin tratar.
MATERIALES Y MÉTODO
ANIMALES
16 terneras de 3 a 5 meses de un establecimiento del Departamento
Paraná, Provincia de Entre Ríos (Argentina) con antecedentes
como libre de brucelosis. Se trabajó con terneras hasta
5 meses para permitir que el lote control sin vacunar pudiese
ser vacunado antes de la edad límite.
LOTES
Se asignó los animales a cada lote (A, B y C) en forma pareada,
es decir si se asignaba para el A una ternera de 4 meses
y excelente estado de nutrición, para los lotes B y C se
asignaron terneras de semejantes características a cada
uno, y así hasta completar los animales en cada lote. De
esta manera los tres lotes eran cualitativamente semejantes.
Los lotes A y B estaban integrados por seis animales, asignándose
a cada uno una vacuna comercial, y al C de cuatro terneras
se lo dejó como control sin tratar.
Se identificaron adecuadamente a cada ternera, con caravanas
numeradas según el orden de ingreso a la manga en día cero,
para evitar que un lote tenga números correlativos.
Antes de aplicar los tratamientos, se extrajo muestras en
dos oportunidades, a todos los animales. En ambas las 16
muestras fueron negativas.
VACUNAS
La asignación de las vacunas a los lotes A y B fue al azar
Se vacunó al lote A con una marca de vacuna, y al lote B
con otra marca. Ambas son aprobadas por el SENASA.
Se trabajó con el método doble ciego por lo que se definió
lo siguiente en cuanto al personal: 1 coordinador del ensayo;
1 vacunador; 1 técnico de campo y 1 laboratorista.
TAREAS DE CAMPO
1. Sorteo: de la asignación de tratamiento a cada lote:
vacuna 1, vacuna 2 y control. El vacunador aplicó el tratamiento
a cada lote según lo asignado.
El vacunador no participó ni en la coordinación ni en el
laboratorio. Él se reservó los registros de los números
individuales de los animales de cada lote, y del tratamiento
que le correspondía a cada uno. Este registro fue enviado
al coordinador el día que se dio por finalizado el ensayo.
2. Muestreos de sangre: realizados por el técnico de campo.
Se puso a los tubos el número correlativo de entrada a la
manga de cada animal (guardándose el Nº de caravana de cada
animal para poder evaluar al final del ensayo), se realizaron
5 sangrados en 45 días.
3. Envío de la muestra: antes de llegar al laboratorio el
coordinador renumeró las muestras para evitar que al laboratorio
llegue siempre el mismo número para el mismo animal.
4. Diagnóstico de laboratorio: los técnicos que realizaron
las pruebas no conocían a qué lote pertenece cada tubo de
muestra. El informe de resultados se envió al coordinador.
5. Se realizaron las pruebas aprobadas para detección de
anticuerpos por el SENASA (BPA; SAT y 2ME) y Elisa indirecto
para detección de anticuerpos.
6. Día de finalización: cuando se dispuso de todos los resultados
de laboratorio, el vacunador envió al coordinador los registros
de identificación de los animales y de las vacunas aplicadas
a cada lote, y se colocaron los resultados correspondientes
a cada animal.
RESULTADOS
Respuesta serológica
Día 0
|
SUEROS |
BPA |
SAT |
2ME |
ELISA |
Caravanas |
Vacuna |
| 1 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12044 |
Vacuna A |
| 2 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12041 |
| 3 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12043 |
| 4 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12045 |
| 5 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12042 |
| 6 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12050 |
| 7 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12047 |
Vacuna B |
| 8 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12046 |
| 9 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12048 |
| 10 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12049 |
| 11 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12051 |
| 12 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12052 |
| 13 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12056 |
Testigos |
| 14 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12055 |
| 15 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12053 |
| 16 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12054 |
El sangrado del día cero se realizó para comprobar
seronegatividad y reevaluar el estado sanitario de las
terneras.
Día 10
|
SUEROS |
BPA |
SAT |
2ME |
ELISA |
Caravanas |
Vacuna |
| 16 |
( + ) |
1/200 |
1/100 |
( + ) |
12041 |
Vacuna A |
| 11 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( - ) |
12042 |
| 15 |
( + ) |
1/200 |
1/100 |
( + ) |
12043 |
| 13 |
( + ) |
1/200 |
1/100 |
( + ) |
12044 |
| 12 |
( + ) |
1/200 |
i 1/50 |
( - ) |
12045 |
| 1 |
( + ) |
1/200 |
i 1/50 |
( + ) |
12050 |
| 10 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( + ) |
12046 |
Vacuna B |
| 14 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( + ) |
12047 |
| 8 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( + ) |
12048 |
| 2 |
( + ) |
1/200 |
i 1/25 |
( + ) |
12049 |
| 6 |
( + ) |
1/200 |
( - ) |
( + ) |
12051 |
| 7 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( + ) |
12052 |
| 9 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12053 |
Testigos |
| 3 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12054 |
| 5 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12055 |
| 4 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12056 |
En el 2° sangrado a los 10 días se observa que todos los
animales vacunados son positivos a las pruebas de
aglutinación (BPA, SAT, 2ME), salvo uno (Nº 6) que da
negativo a 2ME. A la prueba de Elisa, solo dos de los
vacunados dan negativos en este lapso.
Día 20
|
SUEROS |
BPA |
SAT |
2ME |
ELISA |
Caravanas |
Vacuna |
| 14 |
( + ) |
i 1/200 |
1/100 |
( + ) |
12041 |
Vacuna A |
| 10 |
( + ) |
- 1/50 |
- 1/50 |
( + ) |
12042 |
| 11 |
( + ) |
1/100 |
1/100 |
( + ) |
12043 |
| 16 |
( + ) |
1/200 |
1/100 |
( + ) |
12044 |
| 12 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( + ) |
12045 |
| 9 |
( + ) |
1/200 |
- 1/50 |
( + ) |
12050 |
| 13 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( + ) |
12046 |
Vacuna B |
| 15 |
( + ) |
1/200 |
i 1/200 |
( + ) |
12047 |
| 5 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( + ) |
12048 |
| 2 |
( + ) |
1/100 |
- 1/50 |
( + ) |
12049 |
| 3 |
( + ) |
1/200 |
- 1/50 |
( + ) |
12051 |
| 1 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( + ) |
12052 |
| 7 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12053 |
Testigos |
| 4 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12054 |
| 8 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12055 |
| 6 |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
( - ) |
12056 |
Día 30
|
SUEROS |
BPA |
SAT |
2ME |
ELISA |
Caravanas |
Vacuna |
| 6 |
( + ) |
i 1/200 |
1/00 |
( + ) |
12041 |
Vacuna A |
| 16 |
( + ) |
1/100 |
1/100 |
( + ) |
12042 |
| 9 |
( + ) |
1/200 |
1/200 |
( + ) |
12043 |
| 15 |
( + ) |
1/200 |
1/100 |
( + ) |
12044 |
| 10 |
( + ) |
1/200 |
i 1/200 |
( + ) |
12045 |
| 2 |
( + ) |
1/100 |
1/100 |
( + ) |
12050 |
| 11 |
( + ) |
1/200 |
1/100 |
( + ) |
12046 |
Vacuna B |
| 12 |
( + ) |
i 1/200 |
- 1/50 |
( + ) |
12047 |
| 4 |
( + ) |
1/200 |
1/100 |
( + ) |
12048 |
| 3 |
( + ) |
1/200 |
1/100 |
( + ) |
12049 |
| 5 |
( + ) |
1/100 |
1/100 |
( + ) |
12051 |
| 14 |
( + ) |
1/100 |
1/100 |
( + ) |
12052 |
| 7 |
N |
N |
N |
( - ) |
12053 |
Testigos |
| 1 |
N |
N |
N |
( - ) |
12054 |
| 8 |
N |
N |
N |
( - ) |
12055 |
| 13 |
N |
N |
N |
( - ) |
12056 |
Día 45
|
SUEROS |
BPA |
SAT |
2ME |
ELISA |
Caravanas |
Vacuna |
| 3 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12041 |
Vacuna A |
| 1 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12042 |
| 5 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12043 |
| 15 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12044 |
| 6 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12045 |
| 9 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12050 |
| 11 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12046 |
Vacuna B |
| 4 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12047 |
| 8 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12048 |
| 14 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12049 |
| 13 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12051 |
| 7 |
( + ) |
|
|
( + ) |
12052 |
| 16 |
N |
|
|
( - ) |
12053 |
Testigos |
| 10 |
N |
|
|
( - ) |
12054 |
| 12 |
N |
|
|
( - ) |
12055 |
| 2 |
N |
|
|
( - ) |
12056 |
En esta oportunidad no se realizaron las pruebas SAT ni
2ME.
CONCLUSIONES
Si bien existieron variaciones individuales en los
títulos, todas las terneras vacunadas evidenciaron
respuesta serológica positiva existiendo respuestas
semejantes a ambas vacunas. A partir del día 20
posvacunal, todos los vacunados resultaron seropositivos
a todas las pruebas realizadas.
Por lo observado, podría concluirse que las vacunas
aplicadas brindan respuesta inmunitaria positiva desde
los 10 días, no existiendo diferencia entre las mismas.
Los informes completos se pueden descargar en formato MS
Word o PDF para su fácil lectura.
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Evaluación
serológica de dos vacunas
